液相色譜儀分析樣品的預(yù)處理方法

  液相色譜儀分析樣品的預(yù)處理方法有過濾、離心、加速溶劑萃取、超臨界流體萃取、固相萃取、固相微萃取、液相微萃取和衍生化等。

過濾

  常用的濾膜材質(zhì)有纖維素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺應(yīng)用zui廣，是親水材料，適合水溶液的過濾，不被HPLC常用溶劑所腐蝕，不含添加劑。

加速溶劑萃取

1、原理：

  加速溶劑萃取是在提高溫度（50～200℃）和壓力（10.3～20.6MPa）下，用溶劑萃取固體或半固體樣品。

2、特點(diǎn)：

  與傳統(tǒng)萃取方式相比，加速溶劑萃取具有溶劑用量少、快速、對(duì)不同基體可用相同的萃取條件、萃取效率高、選擇性好、使用方便、安全性好和自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)。

超臨界流體萃取

  超臨界流體萃取是利用超臨界流體對(duì)物質(zhì)的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。

  超臨界二氧化碳作為常用的萃取劑已被廣泛應(yīng)用于天然藥物中非極性和弱極性有效成分的提取。

固相萃取

1、原理：

  固相萃取是通過采用選擇性吸附和選擇性洗脫對(duì)樣品進(jìn)行富集、分離和凈化，可以將其近似地看作一種簡(jiǎn)單的液固色譜過程。

2、固相萃取方法：

（1）使液體樣品溶液通過吸附劑，保留其中被測(cè)物質(zhì)，然后選用適當(dāng)強(qiáng)度溶劑沖去雜質(zhì)，再用少量溶劑迅速洗脫被測(cè)物質(zhì)，從而達(dá)到快速分離凈化和濃縮的目的。

（2）可選擇性吸附干擾雜質(zhì)，讓被測(cè)物質(zhì)流出。

（3）可同時(shí)吸附雜質(zhì)和被測(cè)物質(zhì)，再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測(cè)物質(zhì)?！?/span>

固相微萃取

1、原理：

  固相微萃取是基于涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑和樣品之間的吸附－解吸平衡原理，集采樣、萃取、濃縮和進(jìn)樣于一體的無溶劑的樣品微萃取方法。

2、常用固相微萃取方法：

（1）直接固相微萃取：適用于氣體基質(zhì)和干凈的水基質(zhì)。

（2）頂空固相微萃取：適用于任何基質(zhì)，尤其是直接固相微萃取的臟水、油脂、血液、污泥和土壤等。

（3）膜固相微萃取：通過選擇性高分子滲透膜將樣品與萃取頭分離，進(jìn)行間接萃取。滲透膜的作用是使萃取頭不被基質(zhì)污染，提高萃取的選擇性。但由于樣品中待分析物必須通過滲透膜才可以接觸到萃取涂層，因此會(huì)延長(zhǎng)萃取平衡時(shí)間。可用于懸濁液等較臟基質(zhì)中非揮發(fā)性有機(jī)物的監(jiān)測(cè)。

（4）毛細(xì)管固相微萃?。簩怏w或液體樣品通過內(nèi)壁鍵合萃取劑的石英毛細(xì)管，使待分離組分從樣品中萃取出來，具有富集倍數(shù)高和萃取平衡時(shí)間短等特點(diǎn)。

3、優(yōu)點(diǎn)：

（1）集采樣、萃取、濃縮和進(jìn)樣于一體，操作方便，測(cè)定快速。

（2）克服了固相萃取回收率低，吸附劑孔道易堵塞的缺點(diǎn)。

（3）無需任何有機(jī)溶劑，是真正意義上的固相萃取，避免了對(duì)環(huán)境的二次污染。

（4）操作費(fèi)用更加低廉。

（5）儀器簡(jiǎn)單，適合現(xiàn)場(chǎng)分析。

4、缺點(diǎn)：

（1）纖維頭價(jià)格較貴且易碎，使用壽命較短。

（2）涂敷在纖維上的高分子涂層或吸附劑在使用過程中會(huì)有部分丟失。

（3）纖維頭具有記憶效應(yīng)，存在交叉污染。

（4）固相微萃取與HPLC聯(lián)用時(shí)，需要專門的解吸裝置，分析物解吸*需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。

液相微萃取

  液相微萃取是基于樣品和微升級(jí)甚至納升級(jí)有機(jī)溶劑之間的分配平衡原理，集采樣、萃取和濃縮于一體的環(huán)境友好的樣品微萃取方法，特別適合環(huán)境樣品中痕量和超痕量污染物的分析。

1、直接液相微萃取：

（1）原理：

利用懸掛在色譜微量進(jìn)樣器針頭上的有機(jī)溶劑對(duì)樣品溶液中的分析物直接進(jìn)行萃取。

（2）特點(diǎn)：

直接液相微萃取是微型化的液液萃取，克服了傳統(tǒng)液液萃取的諸多不足，僅使用微升級(jí)甚至納升級(jí)的有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取，適應(yīng)現(xiàn)代分析科學(xué)微型化發(fā)展的要求，屬于綠色分析技術(shù)。但是存在許多缺點(diǎn)。

2、中空纖維液相微萃?。?/span>

（1）原理：

以多孔的中空纖維為萃取溶劑的載體而進(jìn)行微萃取。

（2）特點(diǎn)：

1）成本低，裝置簡(jiǎn)單，易與GC、HPLC和CE聯(lián)用。

2）由于中空纖維的多孔性，增加了溶劑與樣品的接觸面積，提高了萃取率。

3）由于微萃取是在纖維孔中進(jìn)行，避免了直接液相微萃取中溶劑易損失的缺點(diǎn)。

4）由于大分子和雜質(zhì)等不能進(jìn)入纖維孔，有固相微萃取和直接液相微萃取不具備的凈化功能。

5）中空纖維是一次性使用的，避免了固相微萃取中可能存在的交叉污染問題。

3、頂空液相微萃取：

（1）原理：

把有機(jī)溶劑懸于樣品溶液上方而進(jìn)行微萃取。

（2）特點(diǎn)：

1）頂空液相微萃取中有樣品溶液、有機(jī)溶劑和頂空相三相，分析物在三相中的化學(xué)勢(shì)是推動(dòng)分析物從樣品溶液進(jìn)入有機(jī)溶劑液滴的驅(qū)動(dòng)力，可以通過不斷攪拌樣品溶液產(chǎn)生連續(xù)的新表面來增強(qiáng)這種驅(qū)動(dòng)力。由于揮發(fā)性化合物從樣品溶液到頂空相再到有機(jī)溶劑，比從樣品溶液直接到有機(jī)溶劑的傳質(zhì)速度快的多，所以對(duì)于水中的揮發(fā)性有機(jī)物，項(xiàng)空液相微萃取比直接液相微萃取更快捷。

2）直接液相微萃取在萃取樣品時(shí)，不可避免的會(huì)在有機(jī)溶劑液滴外成一層穩(wěn)定的擴(kuò)散層，這樣會(huì)阻礙分析物向有機(jī)溶劑液滴的擴(kuò)散，而頂空液相微萃取克服了這一局限，且由于分析物在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)是其在液相中的104倍，對(duì)于擴(kuò)散系數(shù)較大的揮發(fā)性有機(jī)物，項(xiàng)空液相微萃取大大縮短了到達(dá)平衡所需的時(shí)間，同時(shí)還可以極其有效地消除樣品基質(zhì)的干擾，因此，一般情況下被優(yōu)先采用。

（3）應(yīng)用：

適用于分析物容易進(jìn)入樣品溶液上方空間的揮發(fā)性和半揮發(fā)性有機(jī)物。

衍生化

1、紫外衍生化：

為使沒有紫外吸收或紫外吸收很弱的化合物能被紫外檢測(cè)器檢測(cè)，往往通過衍生化反應(yīng)在這些化合物的分子中引入強(qiáng)紫外吸收的基團(tuán)。

2、熒光衍生化：

熒光衍生化已廣泛應(yīng)用于醇、酸、糖、雌激素和生物堿等檢測(cè)，其中在氨基酸樣品檢測(cè)中應(yīng)用zui多。

3、電化學(xué)衍生化：

使樣品組分與衍生化試劑反應(yīng)，生成具有電化學(xué)活性的衍生物，以便對(duì)電化學(xué)檢測(cè)有較靈敏的響應(yīng)。

（來源：分析測(cè)試百科網(wǎng)）